體內哺乳動物骨髓細胞染色體畸變試驗儀

　　體內哺乳動物骨髓細胞染色體畸變試驗儀
 

　　儀器介紹
 

　　實驗目的：
 

　　檢測受試物是否引起哺乳動物骨髓細胞染色體畸變,以評價受試物致突變的可能性
 

　　實驗概述：
 

　　染色體是細胞核中具有特殊結構和遺傳功能的小體,當化學物質作用于細胞周期G1期和S期時誘發(fā)染色體型畸變,而作用于G2期時則誘發(fā)染色單體型畸變。給試驗的大、小鼠腹腔注入秋水仙素抑制細胞分裂時紡錘絲的形成,以增加中期分裂相細胞的比例,并使染色體絲縮短、分散、輪廓清晰。在顯微鏡下觀察染色體數目和形態(tài)。本方法特別適用于需考慮體內代謝活化后的染色體畸變分析。若有證據表明受試物或其代謝產物不能到達骨髓,則不適用于本方法，
 

　　應用范圍
 

　　應用于科研、農業(yè)、衛(wèi)生、教育、霧霾狀態(tài)可吸入顆粒染毒效果研究等各個領域
 

　　符合標準：
 

　　GB/T 15670.16-2017《農藥登記毒理學試驗方法第16部分:體內哺乳動物骨髓細胞染色體畸變試驗》
 

　　二、試驗流程
 

　　1）動物選擇:常用嚙齒類動物(大鼠或小鼠)，通常每組至少5只/性別。
 

　　2）給藥方案:
 

　　單次給藥:通常在采樣前12-48小時給藥(覆蓋細胞周期)
 

　　多次給藥:若受試物代謝或毒性需重復暴露。
 

　　3.陽性對照:已知致畸變劑
 

　　4.陰性對照:溶劑對照(如生理鹽水或DMSO)
 

　　5.采樣時間:通常在給藥后24小時和48小時采集骨髓細胞(覆蓋不同細胞周期階段)
 

　　6.染色體制備:
 

　　處死動物后取出骨髓細胞。
 

　　用秋水仙素(Colchicine)處理，阻斷細胞分裂于中期。低滲處理、固定、制片并染色(如Giemsa染色)
 

　　7.鏡檢分析:
 

　　觀察至少200個中期分裂相/動物，記錄畸變類型和頻率，
 

　　區(qū)分染色體型畸變(如雙著絲粒體)和染色單體型畸變(如斷裂)
 

　　三、結果判定
 

　　1）劑量相關性:畸變率隨劑量增加而升高。
 

　　2）統(tǒng)計學差異:試驗組畸變率顯著高于陰性對照組(如p<0.05)
 

　　3）生物學意義:需結合歷史對照數據和畸變類型綜合評估。